一般情况下，瞬时转染是将 DNA 导入真核细胞的方式之一。在瞬时转染中，重组 DNA 导入感染性强的细胞系以获得目的基因暂时但高水平的表达。

转染的 DNA 不必整合到宿主染色体，可在比稳定转染较短时间内（最多一周左右）收获转染的细胞，并对溶解产物中目的基因的表达进行检测。

如果过表达基因用质粒，如果敲降用的是 siRNA(在 microRNA 实验中，过表达用的是 mimics，敲降用的是 inhibitor)。

通过瞬时转染，将目的基因敲降或者过表达（gain and loss 实验），观察下游靶基因的表达情况，或者细胞表型（phenotype）的变化，例如凋亡，周期，增殖，侵袭，转移等。那该怎么做呢

lipofectamine2000（转染试剂）（避光），Opti-MEMI减血清培养基（避光），目的基因的质粒或者siRNA（以siRNA为例），细胞，六孔板，培养基，以及一些细胞实验所需的普通物品。

1）细胞接种：转染实验前天接种细胞，各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞密度应达到60%~80%覆盖。

2）细胞转染：1.一般六孔板液体每孔在 2ml 左右，不宜太多，或者太少。取两个 1.5mlEP 管，记为 A 管，B 管，每个 EP 管加入 250ul Opti-MEM I，然后 A 管加入 5-10ul lipofectamine 2000，B 管加入 100pM-200pM 的 siRNA（见买来的 siRNA 说明书），然后静置 5min，混合在一起，静置 20min，用 AB 混合液加入到 1.5ml 的无血清培养基 C 内，混匀；

2. 将六孔板里的细胞的液体吸出，用 PBS 清洗两遍；

3. 将 ABC 混合液 2ml 加入六孔板中；

4.4-6h 后换成正常血清培养基（忌放抗生素），在培养箱内培养；

5.48h 后提取 RNA 或者 72h 提取蛋白，或者 48h 后进行后续相关实验。